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無信號1、一抗和二抗不匹配:二抗需和一抗宿主的物種相同(一抗來自鼠,二抗便是抗鼠抗體)。2、沒有足夠的一抗或二抗結(jié)合目標(biāo)蛋白:使用高濃度抗體。4℃延長孵育時間。(如過夜)3、封閉劑與一抗或二抗有交叉反應(yīng):使用溫和的去污劑,如吐溫-20,或換封閉劑(常用脫脂奶粉、BSA、、明膠)。4、一抗不識別待檢物種的蛋白:參照說明書,對比原序列和蛋白序列以確保抗體和目的蛋白會發(fā)生反應(yīng)。設(shè)置陽性對照。5、蛋白上樣
熒光共振能量轉(zhuǎn)移 (FRET) 是兩個發(fā)色團(tuán)(供體分子和受體分子)之間依賴于距離的能量轉(zhuǎn)移。當(dāng)靠近時,電子激發(fā)的供體生色團(tuán)可以通過分子內(nèi)長程偶-偶耦合相互作用以非輻射方式將能量轉(zhuǎn)移到受體生色團(tuán)。因此,能量的轉(zhuǎn)移淬滅了供體的熒光強(qiáng)度并減少了其激發(fā)態(tài)壽命,同時增加了受體生色團(tuán)的排放系數(shù)。由于 FRET 的效率取決于分子間分離的反六次方,因此它是一種有利的技術(shù),可用于研究產(chǎn)生分子接近度變化的各種生物現(xiàn)象
如果您正在做一項實驗,它需要檢測熒光素酶,而這是您的次熒光素酶檢測實驗,您可能會有很多問題和設(shè)。那么,究竟如何入門該實驗,您又該注意哪些方面的問題?別著急,百螢為您一一解答。1.什么是螢光素/螢光素酶反應(yīng)?它如何起作用?在自然界中,當(dāng)化學(xué)能轉(zhuǎn)化為光能時,就會發(fā)生生物發(fā)光。螢火蟲,和海洋生物等許多生物都出于多種原因出現(xiàn)生物發(fā)光。當(dāng)螢光素酶催化螢光素的氧化導(dǎo)致發(fā)光時,就會發(fā)生該過程。2.螢光素酶檢測的
ReadiLink Cy3 Oligo 和 ssDNA 標(biāo)記試劑盒光譜特性
1.百螢ReadiLink Cy3 Oligo和ssDNA標(biāo)記試劑盒簡介?ReadiLink Cy3 Oligo 和 ssDNA 標(biāo)記試劑盒能夠使用 Cy3 熒光團(tuán)對單鏈 DNA 或寡核苷酸進(jìn)行簡單而統(tǒng)一的標(biāo)記。標(biāo)記試劑盒使用我們專有的 TAQuest 末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶 (TdT) 催化非模板定向核苷酸摻入到單鏈 DNA 或寡核苷酸的 3'-末端。該試劑盒針對標(biāo)記進(jìn)行了優(yōu)化,包含標(biāo)記
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