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Tris(三羥甲基氨基甲烷)是生化實驗中最常使用的緩沖液,因為它有好的緩沖能力、毒性低、對生物反應(yīng)的干擾極低,而且純度很高。有超過磷酸鹽的趨勢,如在SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳中都已開始實驗TRIS緩沖液,很少再用磷酸鹽。在分子生物實驗中使用也很廣泛。 1、TRIS(三羥甲基氨基甲烷)的應(yīng)用 ① 在電泳緩沖液中同甘氨酸構(gòu)成緩沖體系穩(wěn)定P值; ② 在凝膠中使用TRIS-HCL緩沖體系穩(wěn)定PH值; ③
如何選擇緩沖區(qū) 選擇緩沖區(qū)時,重要的是要考慮每個緩沖區(qū)的優(yōu)缺點。首先,您計劃在實驗中使用的試劑的pH范圍必須與您選擇的緩沖液的pH范圍一致。其次,您必須考慮濃度,緩沖液毒性,溫度和反應(yīng)性。緩沖液的濃度必須足以說明您計劃在實驗中使用的酸或堿的量。您計劃使用的pH改變成分越多,所需的緩沖液濃度就越高。緩沖液毒性非常重要,因為某些緩沖液可能會對正在使用的細胞產(chǎn)生毒性,因此,如果不確定毒性,可以在實驗中使
TRIS-HCL緩沖液很穩(wěn)定,可被廣泛用于生物化學(xué)和分子生物學(xué)實驗中的緩沖液的制備,它的生理體液的相容性好,與鈣,鎂離子不會形成沉淀,相反,磷酸鹽與鈣、鎂離子會產(chǎn)生沉淀。而且相同pH、相同濃度的TRIS-HCL緩沖液的離子強度比磷酸鹽緩沖液的離子強度低。這對酶類測定尤為重要。因為大離子強度易致有些酶失活。因此,有時用TRIS-HCL代替磷酸鹽緩沖液,效果更好。 但TRIS-HCL緩沖液的pH受溫度
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什么是化學(xué)發(fā)光? 化學(xué)發(fā)光:在常溫下由化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生的光,產(chǎn)生電子能級處于激發(fā)態(tài)的物質(zhì),后者通過躍遷釋放能量產(chǎn)生光子,從而導(dǎo)至的發(fā)光現(xiàn)象?;瘜W(xué)發(fā)光是一個多步驟的過程。 化學(xué)發(fā)光按照發(fā)光時間可分為: 閃光(Flash): 發(fā)光時間在數(shù)秒內(nèi),如吖啶酯,以原位進樣和時間積分法測量。 輝光(Glow): 發(fā)光時間在數(shù)十分鐘以上,如:HRP-Luminol系統(tǒng)、AP-AMPPD系統(tǒng)、黃嘌呤氧化酶系統(tǒng),無須原位
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