詞條
詞條說(shuō)明
有效轉(zhuǎn)移蛋白質(zhì),您需知道以下緩沖液的配置技巧
將蛋白質(zhì)從凝膠轉(zhuǎn)移到固體支持物是蛋白質(zhì)印跡的關(guān)鍵步驟。盡管這是一個(gè)簡(jiǎn)單的過(guò)程,但仍需要一定程度的優(yōu)化,具體取決于蛋白質(zhì)的大小和凝膠的化學(xué)性質(zhì)。在這里,我們提供了一些技巧,可以有效地將蛋白質(zhì)從凝膠轉(zhuǎn)移到膜上。 1.根據(jù)蛋白質(zhì)調(diào)整緩沖液 無(wú)論您是使用現(xiàn)有的實(shí)驗(yàn)室方案還是出版物中的方案,都可能需要根據(jù)目標(biāo)蛋白重新校準(zhǔn)緩沖液配方。您可以將Towbin轉(zhuǎn)移緩沖液(25 mM Tris,192 mM甘氨酸,p
說(shuō)到抗凝劑很多人都不明白,到底是用來(lái)做什么的,簡(jiǎn)單的來(lái)說(shuō)抗凝劑就是防止血液凝固的化學(xué)制劑。在醫(yī)院用來(lái)采集血液做檢測(cè)的采血管中極為常用,在不同的血液檢測(cè)中,適用的抗凝劑也各有不同。常用的抗凝劑有EDTA、檸檬酸鈉、肝素等,下面我們來(lái)看一看,這幾種抗凝劑分別有什么作用機(jī)制。 因?yàn)檠耗谭譃槿齻€(gè)主要階段:第一,凝血酶原激活物形成;第二,凝血酶原激活物催化凝血酶原轉(zhuǎn)變?yōu)槟?;第三,凝血酶催化纖維蛋白原
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什么是化學(xué)發(fā)光? 化學(xué)發(fā)光:在常溫下由化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生的光,產(chǎn)生電子能級(jí)處于激發(fā)態(tài)的物質(zhì),后者通過(guò)躍遷釋放能量產(chǎn)生光子,從而導(dǎo)至的發(fā)光現(xiàn)象?;瘜W(xué)發(fā)光是一個(gè)多步驟的過(guò)程。 化學(xué)發(fā)光按照發(fā)光時(shí)間可分為: 閃光(Flash): 發(fā)光時(shí)間在數(shù)秒內(nèi),如吖啶酯,以原位進(jìn)樣和時(shí)間積分法測(cè)量。 輝光(Glow): 發(fā)光時(shí)間在數(shù)十分鐘以上,如:HRP-Luminol系統(tǒng)、AP-AMPPD系統(tǒng)、黃嘌呤氧化酶系統(tǒng),無(wú)須原位
1. 基本性質(zhì) 吖啶類(lèi)化合物應(yīng)用于化學(xué)發(fā)光檢測(cè)具有以下優(yōu)點(diǎn): ① 背景發(fā)光低,信噪比高; ② 發(fā)光反應(yīng)干擾因素少; ③ 光釋放快速集中、發(fā)光效率高、發(fā)光強(qiáng)度大; ④ 易于與蛋白質(zhì)聯(lián)結(jié)且聯(lián)結(jié)后光子產(chǎn)率不減少; ⑤ 標(biāo)記物穩(wěn)定(在2-8℃下可保存數(shù)月之久),它們?cè)谒腥芙庑院?,穩(wěn)定且不易水解。 吖啶類(lèi)化合物化學(xué)發(fā)光不需要催化劑,在有H2O2 的稀堿性溶液中即能發(fā)光?;衔锏陌l(fā)光為閃光型,加入發(fā)光啟動(dòng)劑
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