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正確選擇緩沖液Tris、HEPES和PIPES及注意事項(xiàng)
如何選擇緩沖區(qū) 選擇緩沖區(qū)時(shí),重要的是要考慮每個(gè)緩沖區(qū)的優(yōu)缺點(diǎn)。首先,您計(jì)劃在實(shí)驗(yàn)中使用的試劑的pH范圍必須與您選擇的緩沖液的pH范圍一致。其次,您必須考慮濃度,緩沖液毒性,溫度和反應(yīng)性。緩沖液的濃度必須足以說明您計(jì)劃在實(shí)驗(yàn)中使用的酸或堿的量。您計(jì)劃使用的pH改變成分越多,所需的緩沖液濃度就越高。緩沖液毒性非常重要,因?yàn)槟承┚彌_液可能會對正在使用的細(xì)胞產(chǎn)生毒性,因此,如果不確定毒性,可以在實(shí)驗(yàn)中使
MOPS化學(xué)名稱3-(N-嗎fei啉)丙磺酸,分子式C7H15NO4S,25°C下pKa為7.14,pH緩沖范圍為6.5~7.9??捎糜冢?(1)作為電泳中的運(yùn)行緩沖液和用于色譜中的蛋白質(zhì)純化; (2)配制成多種瓊脂培養(yǎng)基,用于細(xì)菌,酵母和哺乳動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)。但是,高于20mM的濃度不推薦用于哺乳動(dòng)物細(xì)胞; (3)可用作大腸桿菌細(xì)胞的裂解緩沖液; (4)作為凝膠過濾色譜中的洗脫液; (5)應(yīng)用于N
帶你了解為什么細(xì)胞培養(yǎng)*非HEPES莫屬
什么是細(xì)胞培養(yǎng)? 細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的克隆,它通過細(xì)胞培養(yǎng)得到大量的細(xì)胞或其代謝產(chǎn)物。因?yàn)樯锂a(chǎn)品都是從細(xì)胞得來,所以可以說細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是生物技術(shù)中最核心、最基礎(chǔ)的技術(shù)。但說到細(xì)胞培養(yǎng)我們就不得不提起HEPES這個(gè)有著兩性離子的緩沖劑了。 HEPES HEPES(4-羥乙基哌嗪乙磺酸)CAS號為:7365-45-9,是一種白色結(jié)晶粉末,溶于水,是一種弱酸,其pH緩沖范圍是6.8-8.2,是生物化
三羥甲基氨基甲烷緩沖液,即Tris緩沖液,通常搭配鹽酸來調(diào)節(jié)pH值配制緩沖劑,也有的是用醋酸、硼酸、甘氨酸等其它酸調(diào)節(jié),而很多其它種類的緩沖劑如Bicine、MOPS、HEPES、CAPS等都是用氫氧化鈉堿液來調(diào)節(jié)pH,這是Tris緩沖液的獨(dú)特之處。 三羥甲基氨基甲烷基礎(chǔ)性質(zhì) Tris在室溫(25℃下,它的pKa為8.1;根據(jù)緩沖理論,Tris緩沖液的有效緩沖范圍在pH7.0到9.2之間。 Tri
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